Efecto del medio extensor y de las curvas de enfriamiento y congelamiento en la célula espermática en caballos criollos colombianos

Effect of the extender medium and the cooling and freezing curves over the sperm cell in Colombian creole horses

Contenido principal del artículo

Jair Pérez Osorio
Rafael Otero Arroyo
José Cardona-Alvarez
Paula Ospitia
Alejandra González
Astri Paredes Cañón

Resumen

El objetivo fue analizar los parámetros de motilidad, vigor, morfología e integridad de membrana plasmática para cada uno de los crioprotectores. Cada eyaculado se dividió en dos alícuotas iguales al azar con variaciones en la adición del crioprotector (dimetilformamida 5% o glicerol 5%) y se congelo por el protocolo de criopreservación, con una curva de enfriamiento de 5ºC durante 120 minutos y exposición a vapor de nitrógeno durante 15 minutos antes de ser sumergido al nitrógeno líquido. La viabilidad espermática (motilidad) fue evaluada mediante el test de termorresistencia, la morfología de las células se evalúo fijando el semen en formol salino y la integridad de la membrana plasmática de la cola del espermatozoide  mediante el test hiposmótico. Al evaluar el semen pos descongelación no se observó diferencia significativa (p> 0.05) entre los dos crioprotectores respecto a los parámetros evaluados. Los resultados nos permiten concluir que la utilización del medio extensor INRA 82 modificado con azúcares asociado a leche descremada con adición del 2% de yema de huevo,  y a una curva de enfriamiento moderada de 120 minutos a 5ºC muestran efectos benéficos en los parámetros espermáticos pos descongelamiento de forma independiente al crioprotector utilizado en los caballos criollos colombianos.

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Referencias (VER)

ALVARENGA, M.; PAPA, F.; LEÃO, K.; LANDIM, F.; MEDEIROS, A.; GOMES, G. 2003. The use of alternative cryoprotectans for freezing stallion semen. En: Proceedings of a workshop on transporting gametes and embryos. Havemeyer Foundation. USA.

ALVARENGA, M.; PAPA, F.; LANDIM, F.; MEDEIROS, A. 2005. Amides as cryoprotetans for freezing stallion semen: A review. Anim Reprod Sci 89:105-113.

ARIFIANTINI, R.; PURWANTARA, B.; YUSUF, T.; SAJUTHI, D. 2010. Effect of different cryoprotective agents on skim milk and dimitropoulus extender for stallion semen cryopreservation. J Indonesian Trop Anim Agric 35(1): 68-74.

BARTH, A.; OKO, R. 1989. Abnormal morphology of bovine spermatozoa. Ames: Iowa University Press.

BRASS K. 2001. Inseminación artificial en la especie equina. Biotecnología de la reproducción. INTA. Argentina.

BRINSKO, S.; VARNER, D. 1992. Artificial Insemination and Preservation of Semen. Stallion Management. Vet Clinics of North America: Equine Practice 8: 205 - 218.

FÜRST, R. 2006. Efeito de diferentes tempos de equilíbrio, taxas de congelamento e concentrações espermáticas na fertilidade do sêmen equino. Universidade Federal de Viçosa. Teses de doutorado.

GAO, D.; MAZUR, T.; KLEINHANS, F.; WATSON, P.; NOILES, E.; CRITSER, J. 1992. Glycerol permeability of human spermatozoa and its activation energy. Rev Criobiology 29: 657-667.

GOMES, G.; JACOB, J.; MEDEIROS, A.; PAPA, F.; ALVARENGA M. 2002. Improvement of stallion spermatozoa preservation with alternative cryoprotectants for the Mangalarga Marchador breed. Theriogenology 58 (2/4): 277-279.

HAMMERSTEDT, R.; GRAHAM, J.; NOLAN, J. 1990. Criopreservation of mammalian sperm: what we ask them to survive. J. Andrology 11: 73-88.

HAMMERSTEDT, R. 1992. Artificial insemination using extended liquid semen: An old technology of great value to modern industry. En: 41st Annual National Breeders Roundtable. Southeastern Poultry and Egg Association. Atlanta.

JASKO, D. 1994. Procedures for cooling and freezing of equine semen. Ars Veterinaria 10: 156-165.

KEITH, S. 1998. Evaluation of new crioprotectants for the preservation of equine semen. Fort Collins: Colorado State University. Tesis de Maestría.

MEDEIROS, A.; GOMES, G.; CARMO, M.; PAPA, F.; ALVARENGA, M. 2002. Cryopreservation of stallion sperm using different amides. Theriogenology 58: 273-276.

MESA, A.; HENAO, R. 2012. Efecto del colesterol y la dimetilformamida sobre parámetros posdescongelación en espermatozoides de caballos criollos colombianos. Rev. MVZ Córdoba 17(1): 2908-2915.

MORILLO, A. 2013. Evaluación de crioprotectores alternativos, glicerol y antioxidantes en la congelación del eyaculado equino. Universidad de Extremadura. Tesis de doctorado.

NEIRA, J.; RAMÍREZ, G.; LEÓN, S.; MORENO, D. 2007. Efecto de la asociación L-Glutamina–Etilenglicol en la criopreservación de semen equino. Rev Universidad de La Salle 14 (2): 93-105.

NIE, G.; WENZEL, J. 2001. Adaptation of the hypoosmotic test to asses functional integrity of stallion spermatozoal plasma membranes. Theriogenology 55: 1005-1018.

PALMA, G. 2001. Biotecnología de la reproducción. INTA. Argentina.

PEREZ, J. 2006. Efeito da adição fracionada de dimetil formamida e das curvas de congelamento na viabilidade in vitro pós-descongelamento do espermatozóide eqüino. Universidad Federal de Minas de Gerais. Tesis de maestría.

PEREZ, J.; MELLO, F.; JULIANI, G.; LAGARES, M.; LAGO, L.; HENRY, M. 2008. Effect on post-thaw viability of equine sperm using stepwise addition of dimethylformamide and varying cooling and freezing procedures. Anim Reprod 5: 103-109.

STORNELLI, M.; TITTARELLI, C.; SAVIGNONE, C.; STORNELLI, M. 2005. Efecto de los procesos de criopreservación sobre la fertilidad seminal. Analect Vet 25 (2): 28-35.

RUBIO, J.; QUINTERO, A.; GONZÁLEZ, D. 2009. Efecto de la criopreservación sobre la integridad de la membrana plasmática y acrosomal de espermatozoides de toros. Rev. Cient 19: 382-389.

VARNER, D.; BLANCHARD, T.; LOVE, C.; GARCIA, M.; KENNEY, R. 1988. Effects of cooling rate and storage temperature on equine spermatozoa motility parameters. Theriogenology 29: 1043-1054.

VIDAMENT, M.; YVON, J.; COUTY, I.; ARNAUD, G.; NGUEKAM, J.; NOUE, P. 2001. Advances in cryopreservation of stallion semen in modified INRA 82. Anim Reprod Sci 68: 201-218.

VIDAMENT, M.; DAIRE, C.; YVON, J.; DOLIGEZ, P.; BRUNEAU, B.; MAGISTRINI, M. 2002. Motility and fertility of stallion semen frozen with glycerol and/or dimethyl formamide. Theriogenology 58: 249-251.

WALTERS, E.; BENSON, J.; WOODS, E.; CRITSER, J. 2009. The history of sperm cryopreservation. In: Pacey AA, Tomlinson MJ, editors. Sperm banking: theory and practice. Cambridge: Cambridge University Press.

WOELDERS, H.; MATTHIJS, A.; ENGEL, B. 1997. Effects of trehalose and sucrose osmolarity of the freezing medium and cooling rate on viability and intactness of bull spem after freezing and thawing. Criobology 35(2): 99-105.

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